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二氢辣椒素(Dihydrocapsaicin)液相HPLC检测|茁彩生物

发布日期:2025-10-11 21:20    点击次数:172

二氢辣椒素(Dihydrocapsaicin)是辣椒属植物(Capsicum annuum)中含量第二丰富的辣椒素类物质,占辣椒素总含量的20%-30%,仅次于辣椒素(占60%-70%)。其化学结构与辣椒素的唯一差异在于香草基与酰胺基之间的脂肪链为饱和结构,分子式C₁₈H₂₇NO₃,分子量305.41 Da。作为辣椒辛辣味的主要贡献者之一,二氢辣椒素的Scoville辣度值达150-160万SHU(Scoville Heat Units),仅略低于辣椒素(160-170万SHU)。除赋予食物辛辣风味外,二氢辣椒素还具有多种显著的生理活性,包括激活瞬时受体电位香草素1(TRPV1)受体调节代谢、抑制炎症因子释放、扩张血管改善循环及耗竭P物质发挥镇痛作用。

茁彩生物基于高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)技术建立的二氢辣椒素检测平台,实现了辣椒制品、生物样品中二氢辣椒素的精准定量,为功能性食品开发和药理学研究提供了关键技术支撑。

二氢辣椒素属于香草基酰胺类生物碱,分子结构由三部分组成:

展开剩余80% 香草基:3-甲氧基-4-羟基苯环结构,提供亲水性和生物活性位点 酰胺键:连接香草基与脂肪链的关键官能团(-CONH-) 脂肪链:8-甲基壬酸链(饱和C₁₀侧链),较辣椒素的不饱和侧链增加了分子稳定性

与辣椒素的结构差异及生物学意义:

特征二氢辣椒素辣椒素结构-活性关系侧链饱和度饱和(C₁₀)单不饱和(C₁₀:1)二氢辣椒素脂溶性更高,透皮吸收增加2倍TRPV1激活EC₅₀=0.8 μmol/LEC₅₀=0.5 μmol/L侧链饱和降低TRPV1激动活性,但延长作用时间热稳定性160℃稳定120℃开始分解饱和侧链增强热稳定性,适合高温加工辛辣强度中等(150万SHU)强(160万SHU)侧链双键增加辛辣感

生理功能

代谢调节:TRPV1受体介导的能量消耗增加

二氢辣椒素通过TRPV1受体激活调节能量代谢:

产热作用: 激活棕色脂肪组织TRPV1,促进UCP1表达,增加产热(人体试验:口服100 mg/d可增加静息能量消耗5%-8%) 促进白色脂肪棕色化,增加线粒体氧化磷酸化 脂代谢改善: 上调PPARα/δ表达,促进脂肪酸β-氧化(肝细胞试验:油酸氧化速率增加40%) 抑制脂肪合成酶(FAS)活性,减少脂肪蓄积

抗炎与抗氧化作用

抗炎机制: 抑制NF-κB通路激活,减少IL-6、TNF-α释放(LPS刺激巨噬细胞模型:IL-6降低52%) 抑制COX-2活性(IC₅₀=15 μmol/L),减少前列腺素合成 抗氧化特性: 清除DPPH自由基(EC₅₀=25 μmol/L),活性为维生素C的1/3 增强谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性,降低脂质过氧化产物MDA水平

循环系统保护

血管舒张作用: 刺激内皮细胞释放一氧化氮(NO),浓度依赖性扩张血管(1-10 μmol/L使兔主动脉环舒张30%-60%) 抑制血管紧张素转换酶(ACE)活性(IC₅₀=45 μmol/L),辅助降压 抗血小板聚集: 抑制ADP诱导的血小板聚集(IC₅₀=80 μmol/L),降低血栓形成风险

镇痛与神经调节

外周镇痛: 外用时耗竭感觉神经末梢P物质,阻断疼痛信号传导(辣椒碱乳膏的主要成分) 临床应用:缓解骨关节炎疼痛(NNT=3.2)、带状疱疹后神经痛 中枢调节: 低剂量(1-5 mg/kg)激活脑干TRPV1,调节食欲中枢(动物实验:减少摄食量15%-20%)

HPLC检测方法(常规分析方法)

样品前处理

辣椒制品: 干辣椒粉:过40目筛,称取1.0 g,加入10 mL甲醇超声提取30分钟(功率300W) 辣椒酱:称取5.0 g,加入15 mL石油醚脱脂,弃有机相后用甲醇提取 净化:提取液经0.45 μm滤膜过滤,直接进样或经固相萃取柱净化 生物样品: 血浆:加入3倍体积乙腈沉淀蛋白,离心取上清氮气吹干,甲醇复溶 组织:匀浆后用甲醇-水(7:3)提取,C18固相萃取柱净化

HPLC-UV检测条件

色谱柱:C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),推荐Agilent ZORBAX SB-C18 流动相:甲醇-0.1%磷酸水(75:25,v/v),等度洗脱 检测条件:紫外检测280 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10 μL 分离效果:二氢辣椒素(保留时间8.5 min)与辣椒素(10.2 min)、降二氢辣椒素(7.2 min)基线分离(分离度>2.0)

方法学参数

线性范围:0.1-50 μg/mL(R²>0.999) 检测限:0.05 μg/mL(S/N=3),定量限0.15 μg/mL 精密度:日内RSD<3%,日间RSD<5%(n=6) 回收率:辣椒样品85%-105%,生物样品78%-92%

LC-MS/MS检测方法(高灵敏度方法)

仪器配置: 液相系统:Waters Acquity UPLC H-Class 质谱系统:AB Sciex X500R QTOF,电喷雾正离子模式(ESI⁺) 优化参数: 色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm) 流动相:0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0-5 min 50%B→95%B) 质谱参数:母离子m/z 306.2 [M+H]⁺,子离子m/z 137.1(定量离子,香草基碎片)、167.2(定性离子,酰胺键断裂) 技术优势: 灵敏度提升:检测限低至1 ng/mL,适合血浆、组织等微量样品 结构确证:高分辨质谱提供准确质量数,区分同分异构体

二氢辣椒素作为辣椒中的重要功能成分,其独特的化学结构赋予了激活TRPV1受体、调节代谢、抗炎镇痛等多种生物活性。茁彩生物建立的液相检测技术通过优化前处理和色谱条件,实现了复杂基质中二氢辣椒素的精准定量。随着研究深入,二氢辣椒素在肥胖、炎症性疾病和疼痛管理中的应用前景广阔。

发布于:上海市

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